توضیحات
کیت استخراج DNA باکتریها (Bacteria DNA Extraction Kit) محصولی تخصصی از شرکت پارس توس است که برای جداسازی سریع و دقیق DNA ژنومی از باکتریهای گرم مثبت و منفی طراحی شده است.
این کیت بر پایه فناوری ستونی (Spin Column) و غشای سیلیکا ساخته شده و امکان استخراج DNA خالص، پایدار و بدون آلودگی را تنها در کمتر از یک ساعت فراهم میسازد.
به کمک ترکیب آنزیمهای قدرتمند Lysozyme و Proteinase K، این کیت توانایی شکستن دیواره سلولی و آزادسازی کامل DNA را در هر دو گروه باکتری (مانند E. coli و Bacillus cereus) دارد و به همین دلیل ابزاری مطمئن برای کاربردهای تحقیقاتی و تشخیصی محسوب میشود.
سازگاری با انواع باکتریها و میزان نمونه مورد نیاز
کیت استخراج DNA باکتری پارس توس با گونههای مختلف باکتری سازگار است و تنها به ۳ تا ۵ میلیلیتر محیط کشت تازه نیاز دارد.
این مقدار برای استخراج DNA در اغلب کاربردهای مولکولی از جمله PCR، qPCR، تعیین توالی ژنوم و کلونسازی ژنی کافی است.
اصول عملکرد کیت استخراج DNA باکتری
مکانیزم استخراج بر اساس جذب انتخابی DNA به ستون سیلیکا انجام میشود.
پس از هضم دیواره باکتری توسط Lysozyme و تجزیه پروتئینها با Proteinase K، DNA آزادشده در حضور Binding Buffer (PB) به ستون متصل میشود. سپس مراحل شستشو با بافرهای PW1 و PW2 برای حذف ناخالصیها انجام شده و در نهایت DNA خالص توسط Elution Buffer (PE) از ستون جدا میگردد.
مزایا کیت استخراج DNA باکتری
-
سرعت بالا: استخراج DNA در کمتر از ۶۰ دقیقه
-
سازگار با باکتریهای گرم مثبت و گرم منفی
-
عدم نیاز به مواد شیمیایی سمی در مرحله لیز
-
DNA با خلوص بالا و بدون مهارکننده PCR
-
پروتکل ساده و کاربرپسند، مناسب برای پژوهشگران در سطوح مختلف
-
قابل استفاده در PCR، qPCR، تعیین توالی و مطالعات فیلوژنتیک
اجزای موجود در کیت
-
PB (Binding Buffer): بافر اتصال DNA به ستون
-
PW1 و PW2 (Wash Buffers): بافرهای شستشو برای حذف آلودگیهای سلولی
-
PE (Elution Buffer): محلول آزادسازی DNA
-
Lysozyme Buffer و Lysozyme Powder: برای تخریب دیواره باکتریهای گرم مثبت
-
Proteinase K (Lyophilized & Solution): آنزیم هضم پروتئینها
-
Spin Columns و Collection Tubes: برای اتصال، شستشو و جمعآوری DNA
مواد لازم جهت تهیه جداگانه: اتانول مطلق (Absolute Ethanol) برای مراحل شستشو
شرایط نگهداری
-
Lysozyme و Proteinase K: در دمای °C–20 نگهداری شوند.
-
سایر بافرها و ستونها: در دمای اتاق و به دور از نور مستقیم.
مراحل کلی کار استخراج DNA باکتری با کیت استخراج DNA باکتری
-
برداشت ۳–۵ میلیلیتر محیط کشت باکتری و سانتریفیوژ آن
-
افزودن Lysozyme و انکوباسیون برای تجزیه دیواره سلولی (در باکتریهای گرم مثبت)
-
افزودن Proteinase K برای هضم کامل پروتئینها
-
افزودن Binding Buffer و انتقال محلول به ستون سیلیکا
-
شستشو با PW1 و PW2 برای حذف ناخالصیها
-
بازیابی DNA با Elution Buffer (PE) و جمعآوری در لوله استریل
کاربردهای DNA استخراجشده از این کیت
DNA خالص بهدستآمده از این کیت برای طیف گستردهای از مطالعات مولکولی مناسب است، از جمله:
-
PCR و Real-Time PCR
-
ژنوتایپینگ و کلونسازی ژنی
-
توالییابی ژنوم باکتریها
-
مطالعات فیلوژنتیکی و مقایسهای
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.