توضیحات
در فضای پویا و روبهرشد بیوتکنولوژی و مهندسی ژنتیک، اتکا به معرفهای پایدار و قابلاعتماد، پیششرط موفقیت است. در میان این ابزارها، IPTG القاگر بیان پروتئین نوترکیب یا ایزوپروپیل β-D-۱-تیوگالاکتوپیرانوزید جایگاهی ویژه دارد؛ القاگر استانداردی که برای کنترل و تحریک بیان ژن تحت اپرون Lac بهکار میرود.
شرکت پارس توس با عرضهی IPTG مطابق با استانداردهای کیفی روز، نیاز پژوهشگران و صنعت را به یک القاگر بیان پروتئین نوترکیب دقیق و سازگار تأمین میکند.
IPTG القاگر بیان پروتئین نوترکیب چیست و چگونه عمل میکند؟
IPTG یک ترکیب سنتتیک و مقلد آلولاکتوز است؛ آلولاکتوز متابولیتی طبیعی از لاکتوز است که در E. coli موجب فعالسازی اپرون Lac میشود. در شرایط عادی، Lac Repressor به ناحیه اپراتور متصل است و اجازهی آغاز رونویسی را نمیدهد. با افزودن IPTG، این مولکول به مهارکننده متصل شده و با تغییر کنفورماسیون آن، اتصال مهارکننده از اپراتور برداشته میشود؛ بدین ترتیب، RNA Polymerase میتواند رونویسی ژنهای زیرکنترل پروموتر Lac (مانند ژن β-galactosidase) را آغاز کند و بیان ژن هدف القا میشود.
چرا IPTG بهصرفهتر از آلولاکتوز است؟
برخلاف آلولاکتوز که بهوسیلهی β-galactosidase هیدرولیز و کاهش مییابد، IPTG بهسبب پیوند تیوگلیکوزیدی پایدارش تجزیه نمیشود؛ بنابراین غلظت آن در طول آزمایش ثابت میماند و القای یکنواخت و قابلکنترل را تضمین میکند. این پایداری، نوسان سطح بیان را به حداقل رسانده و IPTG را به گزینهای ایدهآل برای سیستمهای Lac-based (مانند خانوادهٔ وکتورهای pET) تبدیل میکند.
کاربردها در زیست مولکولی و مهندسی ژنتیک
-
القای بیان پروتئین نوترکیب: در سامانههای باکتریایی تحت کنترل Lac / T7-Lac برای تولید داروهای بیولوژیک، واکسنها و آنزیمها.
-
غربالگری آبی/سفید (Blue-White Screening): همراه X-gal برای تمایز کلونیهای نوترکیب (سفید) از غیرنوترکیب (آبی) با القای فعالیت β-galactosidase.
-
مطالعات تنظیم بیان ژن: تنظیم دقیق سطح بیان با کنترل غلظت IPTG و ارزیابی پیامدهای سلولی.
-
طراحی سویههای مهندسیشده: بهعنوان القاگر مطمئن در ساخت بیوسنسورها و مسیرهای بیوسنتزی.
نکات نگهداری
-
IPTG را در دمای توصیهشده، دور از رطوبت و نور مستقیم نگهداری کنید.
-
برای تهیهی محلول استوک از آب مقطر استریل استفاده کرده و محلول را فیلتراسیون استریل نمایید تا از آلودگی میکروبی جلوگیری شود.
-
هنگام کار، اصول بهداشت مولکولی و good lab practice را رعایت کنید.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.